服务中心
首页 > 新闻中心 > 技术文章琼脂糖凝胶2B使用说明

2015-08-02琼脂糖凝胶2B使用说明

琼脂糖凝胶2B
琼脂糖凝胶2B是用2%浓度琼脂糖制备成的球型颗粒,作为凝胶层析介质使用。
1 外观
本品为乳白色球状凝胶,无嗅、无味、无肉眼可见杂质。
2 理化指标
项       目 指       标
基质 2%琼脂糖凝胶
排阻极限 70000~40×106 (球蛋白)
形状 球型
粒径 60~200 μm
最高流速 100 cm/h*
耐压 ----
耐热 pH7水中45℃24h
pH适用范围 4~9 (长时间),3~11(短时间,在位清洗)
化学稳定性 可耐8mol/L尿素、6mol/L盐酸胍
 
 *检测条件: 层析柱10mm×300mm  *柱床高15cm,25℃,流动相为0.1mol/LNaCl。
3 包装
产品以聚胺酯瓶密封包装,外贴标签,注明“品名、体积、颗粒大小”等内容。
4 贮存
产品应密封贮存在4℃~25℃(保存溶液为20% 乙醇),通风、干燥、清洁的地方。不能冷冻。
用过的柱子贮存在4℃(20% 乙醇)。
5 注意事项
本品应避免与氧化剂接触,避免长时间暴露在空气中。
6 运输
运输中应避免日晒、雨淋、重压,严禁与有毒、有害物品混运。
7 保质期
5年。
8 应用
本产品为传统的琼脂糖介质,非特异性吸附低,回收率高,可多次重复使用等特点,用于分子量差异大、对分辨率要求不高的样品的凝胶层析纯化。下面简要介绍介质的使用过程。
8.1 装柱
凝胶过滤介质的使用对装柱的要求较高,为了保证分离效果,一般通过柱子上加一个装柱器来使分离柱装满凝胶,或采用带有轴向加压装置的柱子。凝胶柱床一般高于60cm。装柱效果可用染料或丙酮-水溶液进行检验。
以下过程为通用介质装填过程。若为带有轴向加压装置的柱子,可在柱床稳定后将柱床压紧,接好管路。
(1)让所有的材料和试剂达到室温。配制缓冲液。凝胶层析上样、平衡和洗脱只用一种低盐浓度的缓冲液。
(2)选择一根一定直径的柱子,长约30~60cm,根据柱子大小取所需量的凝胶(约为柱床体积的1.15倍),清洗掉20%乙醇,抽干,用缓冲液(按凝胶:缓冲液=3:1的比例)配成匀浆。不要剧烈搅动,以免搅坏微球。
(3)将柱内及柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位(液面略高于滤膜),务必使底端无气泡。
(4)用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内,注意勿使产生气泡。打开柱子出液口,使凝胶在柱内自由沉降,连结好柱子顶端柱头。
(5)打开蠕动泵,让缓冲液缓慢流过,使柱床稳定。
(6)最好用一个装柱器辅助装柱。装完后柱床上端轻轻刮平,上好柱头。
8.2 平衡
让缓冲液以一定流速流过柱子,到流出液电导和pH不变。
8.3 上样
⑴样品用缓冲液配制,浑浊的样品要离心和过滤后上样。含盐量过大、浓度过小的样品要先做处理,再上样。
⑵介质对样品组分的分离是按组分分子量大小进行的,分子量大的先流出来。
⑶上样体积约为柱体积的1~2%,越小分离越好。
8.4 洗脱
用缓冲液洗脱,洗脱中保持流速、缓冲液组成不变。
8.5 再生
一般用缓冲液洗到平衡,可再次使用。
8.6 注意
在装柱、使用和保存柱子的时候,始终要避免柱子流干气泡进入。
上海宝曼生物科技有限公司
各部门联系方式如下↓
企业Q Q:390736915
微信公众号:Baomanbio

销售电话:021-62130998
外贸电话:021-62130995
投诉电话:021-60543085
物流电话:021-51853547
采购电话:021-51853546
传真电话:021-61310835
 
请关注微信公众号
baomanbio
点击这里给我发消息